蛋白胨的生化指标是指在平时试验中的测定的一些指数,下面我们就来介绍一下:
1、糖发酵试验:称取胨2.0g、NaCL 0.5g、酚红0.002g、蒸馏水或去离子水100ml,配制溶液,调节其pH值7.2~7.4,以每管6.0ml分装,115℃/15min高压灭菌,接种大肠埃希氏杆菌的18~24h的新鲜培养物,35±2℃培养18~24h观察结果,应为阴性,即培养基颜色应为橙红色。培养基颜色变成黄色报告阳性。
2、H2S试验:称取胨1.0g,加100ml的蒸馏水或去离子水配制成1.0%的胨水,以每管6ml分装,121℃/15min高压灭菌,接种伤寒沙门氏菌的18~24h的新鲜培养物,将PbAc试纸插入试管中,试纸下段距离液面2~3cm,盖好试管盖。30~35℃培养24~48h,观察结果,PbAc试纸条的黑色域不得小于0.5cm。
3、靛基质(吲哚)试验:称取胨1.0g,加100ml的蒸馏水或去离子水配制成1.0%的胨水,以每管6ml分装,121℃/15min高压灭菌,分别接种大肠埃希氏杆菌、伤寒沙门氏菌的18~24h的新鲜培养物,35±2℃培养18~24h。观察结果时每管加入4~5滴入靛基质试剂,大肠埃希氏杆菌应为阳性,10s内液面上出现玫瑰红色环,伤寒沙门氏菌呈阴性。
4、V-P试验:称取胨0.7g、葡萄糖0.5g、NaCl 0.5g,加100ml蒸馏水或去离子水配制溶液,调节其pH7.2~7.4,以每管6ml分装115℃/15min高压灭菌,分别接种产气肠杆菌(如45103)、大肠埃希氏杆菌(如44104)的18~24h的新鲜培养物,35±2℃培养18~24h。观察结果时,除去试管帽,依次加入VP试剂甲、乙液, 甲乙液比例:3/1,加入的量甲液9滴,乙液3滴;之后放置36℃培养箱孵育,30min内接种产气肠杆菌的管中出现红色的为阳性反应,大肠杆菌的呈阴性反应。
5、生长试验:配制培养基:2.0g胨、0.5gNaCl、1.5g的琼脂,加入到100mL蒸馏水或去离子水中,加热完全溶解,调节pH值7.2~7.4,121℃/15min高压灭菌,待温度降到50℃左右时倾注平板,接种100~1000cfu/ml的金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏杆菌,35±2℃培养18~24h观察结果,应生长良好。接种的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是通过比浊的方法稀释到-7和-8,接种量为1ml,每个稀释度需作两块平板,要求-7平板上生长菌落100左右。
6、色素试验:配制培养基:2.0g胨、0.5gNaCl、1.5g的琼脂, 加入到100mL蒸馏水或去离子水中,加热完全溶解,调节pH值7.2~7.4,121℃/15min高压灭菌,待温度降到50℃左右时倾注平板, 充分凝固后,划线(四区划线接种的方式)接种金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞杆菌的新鲜培养物,35±2℃培养18~24h观察结果,均应四区均生长,接种金黄色葡萄球菌的平板上有黄色色素生成,接种铜绿假单胞杆菌的平板上有绿色色素生成。
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